抗生素（氟苯尼考）与肽力生协同作用的抑菌效果试验

2016-02-26

1.实验目的

考察肽力生在不同稀释倍数情况下，对抗生素（氟苯尼考）抑菌效果是否有增强作用。

2.实验材料

肽力生、98%氟苯尼考；指示菌：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。

3.实验设计

试验设计

项目	药物组合
对照组	氟苯尼考10ppm
试验I组	氟苯尼考10ppm+肽力生15.625ppm
试验II组	氟苯尼考10ppm+肽力生31.5ppm
试验III组	氟苯尼考10ppm+肽力生62.5ppm
试验Ⅳ组	氟苯尼考10ppm+肽力生125ppm
试验Ⅴ组	氟苯尼考10ppm+肽力生250ppm
试验Ⅵ组	氟苯尼考10ppm+肽力生500ppm
试验Ⅶ组	氟苯尼考10ppm+肽力生1000ppm

4.实验步骤

4.1 指示菌：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌

4.2 牛肉膏蛋白胨液体培养基：牛肉膏0.3%，蛋白胨1%，NaCl0.5%，调pH值为7.0，灭菌备用。

4.3 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基：牛肉膏0.3%，蛋白胨1%，NaCl0.5%，琼脂粉1.6%，调pH值为7.0，灭菌备用。

4.4 实验步骤：

1）将已灭菌的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养皿内，待其凝固。

2）将培养24h的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌菌液（用牛肉膏蛋白胨液体培养基37℃，200rpm摇瓶培养）稀释10倍，移液枪吸取0.2mL，均匀涂布在固体培养基表面。

3）以无菌操作在培养基表面垂直放上牛津杯（内径6mm、外径8mm、高10mm的圆形小管，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管），轻轻加压，使其与培养基接触无空隙。

4）在杯中加入100μL待检样品，勿使其外溢，置于37℃培养18-24小时，观察结果，测量抑菌圈直径。在培养中，一方面试验菌开始生长；另一方面抗生素呈球面扩散，抑菌圈越大，抑菌效果最好。

5.实验结果

实验结果见表1。

表1 抗生素（98%氟苯尼考）与肽力生协同作用的抑菌实验结果

实验	抑菌圈直径（Φmm）指示菌：大肠杆菌	抑菌圈直径（Φmm）指示菌：金黄色葡萄球菌
对照组（0）	10	14
实验组（1）	11	16
实验组（2）	11	17
实验组（3）	11	17
实验组（4）	12	17
实验组（5）	13	17
实验组（6）	13	17
实验组（7）	13	17

6.实验图片

7.结论

从表1，图1-1、图2-2的实验结果可以看出：①抗生素（98%氟苯尼考）添加肽力生对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均具有不同程度的协同抑菌作用；②10mg/100ml抗生素（98%氟苯尼考）添加25mg肽力生对大肠杆菌的协同抑菌效果最显著；③10mg/100ml抗生素（98%氟苯尼考）添加3.125mg肽力生对金黄色葡萄球菌的协同抑菌效果最显著；④综合试验结果10mg/100ml抗生素（98%氟苯尼考）添加12.5mg肽力生对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的协同抑菌效果最适宜；⑤98%氟苯尼考和肽力生在饲料中的最佳添加量为每吨饲料添加100g氟苯尼考（98%）、添加125g肽力生（效价40000u/g以上）。